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紫外分光光度計的校正方法


紫外分光光度計的校正方法

校正內容

1.波長的準確度試驗,以儀器顯示的波長數值與單色光的實際波長值之間誤差表示,應在±1.0nm范圍內。可用儀器中氘燈的486.02nm656.10nm譜線進行校正;2.吸收度的準確度試驗;3.雜散光的試驗;4.波長重現性試驗;5.分辨率試驗。

吸光度的校正方法

校正吸光度常用一很純物質一定濃度的溶液為標準,且此溶液的吸光度系數經不同實驗室核對,為了使標準液吸光度不受測定波長的微移動而有改變,常選擇具有較平滑吸收高峰的物質,同時要求溶液穩定,且在相當的波長范圍內吸收度的改變符合Beer-Lambert定律,常用硫酸銅、硫酸銨鈷和硝酸鈉或鉀的溶液。鉻酸鉀溶液是*常用的標準溶液,此溶液在紫外區和可見區均適用。

波長或波數的校正方法

可用具有窄吸收帶的溶液,濾光片或蒸氣來校正所需要的光波范圍。如果要求很高的精密度時,可用放電燈泡發射的射線來校正。有的光譜儀其上已裝有一個為校正用的燈。苯的蒸氣對校正一定范圍的波長亦很有用,可用一小滴苯放于一厘米厚的吸收杯中,測其吸收波長,在遠紫外區可用氧氣的吸收帶進行校正。用各種稀土金屬的濾光片,可以很快地校正波長,但準確度不如上述方法高。常用含有鈥和釹、鐠離子的濾光片。

雜散光的校正方法

小量的雜散光往往會引起較大的測量誤差,它的校正可用一個能完全吸收某一波長單色光,且在其他波長吸收很弱的溶液。從這個溶液所表現的透光情況可推測雜散光的近似值。由雜散光帶來的偽吸收帶,亦可用Beer-Lambert定律來檢查,但用此定律檢查偽吸收帶誤差較大。由切斷范圍之外所表現的透射比可得出近似的雜散光百分數。若所含雜散光大于0.1%,應設法減低,或對測得的吸收光度進行校正。由雜散光引起的誤差與雜散輻射成正比,因此校正值很容易從化合物的近于正確的曲線計算而得。此外,還可用一個適當的濾光片,該濾光片在測定波長范圍內完全透光,但吸收此范圍外的光波,由此來消除雜散光。

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